技术标签:猪戊型肝炎病毒,pORF3,分子机制
产业分类:经济分类:农、林、牧、渔业
成果所属人:海南大学技术成熟度:小试阶段
是否指派:否计划转让金额:面议
合作方式:联系人:牛老师
联系电话:联系邮箱:niujj@ige-live.com
中图分类:S858.28
学科分类:230.30
成果类别:基础理论
成果水平:未评价
研究起止时间:2007-01~2009-12
评价形式:结题
为了揭示SHEV-细胞相互作用机制, 开展了海口和三亚部分规模猪场的SHEV感染的血清学调查,结果发现, 抗-SHEV 抗体总阳性率达到92.6%.对SHEVpORF3 进行了原核表达,并进行了纯化,制备了抗血清.建立了以纯化的GST-ORF3融合蛋白为包被抗原的间接ELISA检测方法.构建并鉴定了真核表达载体pEGFP-ORF3, 在HEK 293细胞中成功表达.建立了整合有pEGFP-ORF3表达质粒的稳定细胞系和整合有pEGFP-C1的HEK293细胞系.筛选得到能有效抑制ORF3 mRNA和蛋白表达的siRNA.证实了SHEV pORF3可以通过使ERK1/2磷酸化, 影响MAPK通路.研究发现, 在in vitro条件下,在稳定表达SHEV的pORF3的HEK293细胞,miR-221/222 显著下调,而且直接调控p27kip1a.这些研究成果为SHE的防治提供了重要依据.出版译著1部, 发表论文9篇(SCI论文2篇).