技术标签:甘蔗,成熟,相关基因,克隆,鉴定
产业分类:经济分类:农、林、牧、渔业
成果所属人:海南大学技术成熟度:小试阶段
是否指派:否计划转让金额:面议
合作方式:联系人:牛老师
联系电话:联系邮箱:niujj@ige-live.com
中图分类:S566.1
学科分类:210.30
成果类别:基础理论
成果水平:未评价
研究起止时间:2011-01~2012-12
评价形式:验收
甘蔗是一种最为重要的糖料作物,同时也是一种重要的能源作物。提高甘蔗的产量和含糖量始终是甘蔗育种的主要目标。转基因技术对提高甘蔗的蔗糖产量意义重大,目前国内还没有自主研发的适应商业生产的相关基因。随着甘蔗的成熟,甘蔗茎杆中积累的糖分在不断的增加,其薄壁细胞中的渗透压也在不断增加,这意味着大量的与糖分积累和抗逆相关的基因也得到了大量的表达,对这些基因进行克隆和功能分析有助于了解甘蔗茎成熟的分子机制;另外这些基因的获得也为进一步提高甘蔗的糖分和(或)抗逆性打下良好的基础。 本项目中,通过对甘蔗不同含糖量、茎节性状、解剖结构进行比较分析,选取较合适的甘蔗老茎与嫩茎结结位,应用SSH、cDNA文库构建、RACE、PCR等技术克隆甘蔗茎成熟相关的糖分积累相关、抗逆相关基因,对新发现的部分相关基因进行功能分析及预测为运用基因工程提高甘蔗产量打下良好基础。在该项研究中,得出适合文库构建的甘蔗茎RNA的提取方法,利用Clontch公司的试剂盒进行SSH文库和全长cDNA文库构建,并对SSH所得的EST序列进行进一步验证及测序分析,筛选出选重要甘蔗茎成熟相关基因。使用甘蔗老茎库液(cDNA文库库液)为模板,,以cDNA文库库液为模板,用cDNA文库与RACE技术相结合的方法快速克隆一些与甘蔗茎成熟相关的糖分积累和抗逆基因。该方法速度快、效率高。采用网络比对等方法对部分基因进行功能预测与分析。